WATERS色谱柱与其它生物分离一样，相比基于HPLC的色谱柱，使用粒径更小的UPLC/UHPLC色谱柱可以在更短的时间内实现优异的组分分离度。通常情况下，采用盐浓度不断增加的梯度进行分离，体积较小且所带电荷较少的肽会在较长的肽片段之前洗脱。与反相肽分离不同，洗脱液的pH会显著影响分离，因此需要进行方法开发以获得满意的色谱结果。
WATERS色谱柱采用极性基团嵌入技术，是在通常的C18／C8链中引入特定的极性基团所得到的新型固定相。大量研究表明，极性官能团可有效阻挡有机碱与硅胶表面残余硅羟基的不良作用，因而其峰形比相应的C18／C8柱更优。同时，这类固定相允许使用全水流动相而不会发生“相塌陷”现象，因而可用于分离许多亲水性化合物。
使用WATERS色谱柱遇到柱效低怎么办？
新柱（未进过样品或只进过柱效测试标样）柱效低：以原厂报告的条件下测试同样的标样，相比较根据仪器不同，如果250*4.6mm，5um柱效在2000左右的差异可以认为是符合出厂要求的；如果您的仪器测试结果相差太大，可能是系统问题，包括接了保护柱，平衡时间不够等引起。需取下保护柱（测试柱效时不能加保护柱），增加平衡时间，对于新柱，50mm长的柱子平衡时间在30min以上，150mm的柱子在45min以上，250mm长的柱子在75min以上。也有可能是柱子本身柱效低，寄回公司检测，如果核实，可提供相关更换处理，
使用一段时间后的旧柱柱效降低：排除系统原因，基本是测试的条件和样品导致，如测试条件的pH值在柱子耐受pH值范围以外，导致柱子内填料的溶解或键和相流失，此外，样品前处理不好也会使柱子很快损坏。
更新时间：2019-10-21 
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