液相色谱柱反冲洗是一种用于清除柱头污染物的维护方法,需谨慎操作以避免损坏色谱柱。核心方法包括使用极性递增的溶剂系列(如
反冲洗操作步骤
预处理:若流动相含缓冲盐,先用纯水冲洗5-10倍柱体积去除盐分,防止有机溶剂导致盐沉淀。
溶剂冲洗顺序:
反向冲洗流速控制在1-2 mL/min(250×4.6 mm柱),避免压力过高。
溶剂顺序:100%水 → 100%甲醇 → 100%乙腈 → 100%异丙醇→ 100%二氯甲烷→ 100%正己烷。
每种溶剂冲洗至少10倍柱体积(如250×4.6 mm柱约25 mL)。
过渡与平衡:以
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